Svampar (svampar) finns ofta i naturen. Även om cirka 400 000 arter hittills har beskrivits, kan endast 100-150 av dem orsaka infektion hos människor. Sjukdomar orsakade av svamp kallas mykos. Den vetenskapsgren som studerar svampar och svampsjukdomar kallas mykologi.
Svampar är mikroorganismer med en eukaryot struktur. Eftersom de inte innehåller klorofyll kan de inte utföra fotosyntes och skiljer sig från växter med denna funktion. De är fakultativa anaerober eller obligatoriska aerober. Svampar är heterofila mikroorganismer, vilket betyder att de använder organiska föreningar som kol- och energikällor. De smälter mat genom att släppa ut hydrolytiska enzymer i den yttre miljön och tar de smälta näringsämnena in i cellerna genom absorption.
Vissa svampar har kapslar och har en polysackaridstruktur. Kapselpolysackarid består av minst tre olika polymerer: glukuronoxylomannan, galaktoxylomannan och mannoprotein. Hos svampar består 90 % av cellväggen av polysackaridpolymerer som kitin, glukan, mannan och kitosan och 10 % består av proteiner, glykoproteiner och lipider. Typen och mängden polysackarider varierar beroende på svampart. Cellväggen ger cellen dess form, skyddar den från osmotisk chock, är antigen och har fysiologisk aktivitet eftersom den innehåller vissa enzymer. Cellmembranet är en dubbelskiktsstruktur som består av fosfolipider, proteiner och steroler, liknande däggdjursmembran. Till skillnad från däggdjursmembranet innehåller det ergosterol och zymosterol istället för kolesterol. Cellmembranets funktioner inkluderar att skydda cytoplasman, reglera substansutbytet och hjälpa till med kapsel- och väggsyntes. Målplatsen för de flesta av de läkemedel mot svampgruppen som används idag för terapeutiska ändamål är ergosterol, som ligger i membranet.
Svampsporer är ansvariga för reproduktionen. Reproduktion sker genom sexuella sporer (zygospore, ascospore, basidiospore), asexuella sporer (blastospore, arthrospore, chlamydospore, macroconidium, microconidium, sporangiospore) eller parasexuellt. Den vetenskapliga klassificeringen av svampar är baserad på sexuella sporer. Enligt deras morfologiska utseende; Den är uppdelad i två: jästsvamp (Candida, Saccharomyces, etc.) och mögel (Ascomycetes, Zygomycetes, Deuteromycetes, etc.).
Diagnostiska tester
Isolering och identifiering av en mängd olika svampar utförs genom att tillämpa odlingsbaserade och icke-kulturbaserade (serologiska, molekylära) metoder. Innan behandling mot svamp påbörjas bör kliniska prover samlas in under aseptiska förhållanden, inte placeras i formalin, och levereras till laboratoriet i sterila behållare med det bärarmedium som är mest lämpat för materialet.
På grund av den långa tiden för odlingsresultat som ska erhållas är direkt mikroskopisk utvärdering av stor vikt. Kliniska prover som skickas till laboratoriet utvärderas först makroskopiskt och initial information om förekomst av jäst eller mögel erhålls i den mikroskopiska utvärderingen. Vid direkt mikroskopisk undersökning används KOH med en hastighet av 10-20-30%, vanligtvis 30%. Hud- och nagelskrap, fjädrar, hårstrån, ull, hudbitar etc. KOH tillsätts till det uppsamlade materialet för att lösa upp kitinskiktet och avslöja svamphyfer. För färgad mikroskopisk undersökning används färgämnen som gramfärgning, laktofenol bomullsblått, calcofluor white, India ink, Grocott-Gomori mataminsilvering, pyrodic acid-Schiff (PAS), Giemsa, Wright och Mason-Fontana. Träs ljus kan också användas för att söka efter svampar på infekterade ytor. Det är ultraviolett En stråle som passerar genom ett nickeloxidfilter. Under detta ljus kan vissa svampar identifieras genom att ge färger som ljusgul, grön, gul fluorescens och korallröd fluorescens.
Kultur är en mer specifik diagnostisk metod än direkt mikroskopi. Den används när en definitiv diagnos inte kan ställas eller för att bestämma typen av svamp. Vid kulturutvärdering är morfologin hos kolonierna och den resulterande pigmentfärgen prioritet. Medierna som används varierar beroende på vilket kliniskt prov som tas. Odlingsmedier är uppdelade i primära isoleringsändamål och specifika ändamål.
Primära isoleringsändamål;
- Sabauraud-dextros-agar (SDA) och Brain heart infusion agar (BHI); Det används för primär isolering av saprofytiska och patogena svampar. För prov tagna från icke-sterila miljöer används SDA och BHI med antibiotika. De förökar sig på 1-4 veckor vid rumstemperatur och 37°C och bildar kolonier som vanligtvis är benvita eller krämfärgade, har en mjuk konsistens och är typiskt jästiga och illaluktande.
-Hämmande mögelagar och Jästextrakt fosf. hästagar; Primär isolering av patogena svampar.
Särskilda ändamål;
-Majsmjölsgelé med Tween 80 och trypanblått (MUJ); Chlamydospore-diagnos av Candida albicans,
-Bomullsfrötransformationsagar; Transformation av Blastomyces dermatitidis från mögelfas till jästfas,
-Czapeks agar; Aspergillus-isolering,
Fågelfröagar (Staib-agar); Cryptococcus neoformas isolering,
-CHROMagar Candida; Isolering av Candida-arter baserat på enzymatisk reaktionsbildning,
-Jästfermenteringsbuljong; Jästegenskaper hos jäst,
-Jästkväveagar; Kolhydratassimileringsegenskaper hos jästsvampar.
Dessutom påskyndar BACTEC- och BacT/Alert-metoderna upptäckten av svampar i blodkulturer.
Germ-Tube Test; I detta test eftersträvas könsrörsbildning från celler. En lätt suspension av jästliknande mikroorganismer görs i 0,5-1,0 ml sterilt serum och inkuberas vid 37°C i 2-4 timmar. En droppe av blandningen placeras på objektglaset och täcks med ett täckglas. Det undersöks i mikroskop om groddröret har bildats från cellerna. Denna situation är karakteristisk för C. albicans.
Tester för att detektera svampantigener eller metaboliter i serum eller kroppsvätskor är mer värdefulla för den serologiska diagnosen av systemiska svampinfektioner. Antikroppar kan detekteras med latexagglutination (LA), ELISA, Enzyme Immuno Assay (EIA), Radioimmuno Assay (RIA), immunoelektrofores (IE) och immundiffusion (ID) metoder. Med dessa metoder, antigener i cellstrukturen eller metaboliter; mannan, D-arabinitol, (1-3)-β-glukan, polysackarid glukoroxylomannan, galaktomannan och enolas kan detekteras.
Även om molekylära diagnostiska metoder blir allt populärare, kan de användas som en rutinmetod i alla kliniska laboratoriet beror på ekonomiska skäl och Det är inte vanligt på grund av bristande standardisering. Signalamplifieringsmetoder som använder nukleinsyraamplifiering och hybridiseringsprober används för att detektera och identifiera infektiösa svampar. Nukleinsyraamplifieringsteknologier använder polymeraskedjereaktion (PCR) eller liknande metoder. Svampbelastningen är mycket låg och odling och serologisk diagnos är ännu inte tillgänglig. Man kan säga att PCR-baserade diagnostiska metoder kommer att vara mycket effektivare i den otillräckliga fasen. Omvänt transkriptas (RT) PCR syftar till att amplifiera mål-RNA:t.
Läs: 0